详细内容
本试剂盒采用独特的缓冲体系和离心吸附柱,既可从TAE或TBE琼脂糖凝胶中回收DNA片段,又可用于直接纯化PCR产物,能够满足多种实验需要。溶胶液PC中含有pH指示剂,可根据颜色来判断溶胶状态。使用本产品可回收100bp~8kb大小的DNA片段,回收率可达80%。使用本试剂盒回收的DNA可直接用于连接、转化、酶切、测序等分子生物学实验。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
通用型DNA纯化回收试剂盒 | Universal DNA Purification and Recovery Kit | 50次|200次 |
产品特点:
兼容性强:既可用作DNA产物直接纯化,又可用作DNA凝胶回收。
操作简便、可回收胶体积大:可按照胶块与溶胶液等比进行溶胶。
稳定、可靠:配有指示剂,可直观判断影响DNA吸附的pH值,又可保证DNA与膜充分结合,提高回收效率。
产品组成:
组分 50T
溶液PC 25mL
平衡液BL 30mL
漂洗液PW 15mL
洗脱缓冲液EB 15mL
吸附柱CB2 50个
收集管(2mL) 50个
保存条件:室温(15~25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2~8℃。2~8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。
注意事项:(请务必在使用本试剂盒之阅读此注意事项)
平衡液BL的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。使用请先检查平衡液BL是否出现浑浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。
溶液PC含有pH指示剂,为黄色,指示pH≤7.5。
大鼠Apelin受体(APLNR)elisa检测试剂盒
大鼠Apelin蛋白(APLN)elisa检测试剂盒
大鼠Apelin大鼠13蛋白(AP13)elisa检测试剂盒
大鼠AMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)elisa检测试剂盒
大鼠AMPA离子能谷氨酸受体1(GRIA1)elisa检测试剂盒
大鼠磷脂转运蛋白(PLTP)elisa检测试剂盒
大鼠磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cβ1(PLCβ1)elisa检测试剂盒
大鼠磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)elisa检测试剂盒
大鼠磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)elisa检测试剂盒
大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)elisa检测试剂盒
通用型DNA纯化回收试剂盒人CXC趋化因子配体16(CXCL16)elisa检测试剂盒
人CXC趋化因子受体3(CXCR3)elisa分析检测试剂盒
人CXC趋化因子受体3(CXCR3)elisa检测试剂盒免费代测
人CXC趋化因子受体4(CXCR4)elisa分析检测试剂盒
人CXC趋化因子受体4(CXCR4)elisa检测试剂盒
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
更新时间:2023/11/6 14:17:54
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