预染琼脂糖配胶液(100×,用型)

详细内容

本产品是本公司在百无忧电泳液基础上开发的预染琼脂糖配胶液，含抗水解的核酸染料，用于配制琼脂糖凝胶（也可用于电泳，但不经济）。

产品特点：

1. 预染，含低毒稳定的核酸染料，用户不需要再购买EB、SYBR green I、GelGreen等染料。

2. 稳定，可以常温放置两年，使用效果不衰减。染料不怕光、不怕水、不怕热。

3. 性价比高，100mL的本产品可以配制至少100块mini琼脂糖胶。

4. 所配制的琼脂糖凝胶跟百无忧电泳液（货号：BTN151103）和TBE 电泳液兼容，但跟TAE 电泳液不兼容。

5. 本产品配制的琼脂糖凝胶尤其适用于长度在1500bp 以下的DNA片段的电泳，分离长于1500bp的PCR片段时，如果条带多，则不推荐使用本产品。

6. 用本产品配制的凝胶电泳得到的DNA片段的胶回收率高于TAE胶和TBE胶，不影响后续的DNA 胶回收和DNA 连接等反应。

保存条件：常温保存和运输，有效期两年。若低温放置有结晶（主要是染料在高盐低温条件下容易析出），请摇匀后使用，稀释100 倍后染料晶体会自然溶解。

自备试剂：去离子水、琼脂糖

使用方法：

将本产品用去离子水稀释100 倍（1mL 本产品加99mL 去离子水，也可加100mL 去离子水），混匀后直接用于配制琼脂糖胶，琼脂糖胶的浓度根据要分离的DNA片段大小决定。由于本产品适用于分离1500bp 以下的DNA片段，因此琼脂糖的浓度一般在1-2%。胶凝固后直接用于电泳，电泳液可以使用1×百无忧电泳液，也可以使用1×TBE 电泳液，按常规的电压电泳即可。
大鼠5核苷酸酶(5-NT)elisa检测试剂盒

大鼠5＇-AMP活化蛋白激酶α-2催化亚基(PRKAA2)elisa检测试剂盒

大鼠4-羟基壬烯酸(HNE)elisa检测试剂盒

大鼠3氧代5α类固醇4脱氢酶2(SRD5A2)elisa检测试剂盒

大鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)elisa检测试剂盒
大鼠可溶性CD14(sCD14)elisa检测试剂盒

大鼠可溶性CD105(sCD105)elisa检测试剂盒

大鼠颗粒酶B(Gzms-B)elisa检测试剂盒

大鼠颗粒酶A(Gzms-A)elisa检测试剂盒

大鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)elisa检测试剂盒
预染琼脂糖配胶液(100×,用型)人Apelin-12elisa检测试剂盒

人ATP酶（ATP）elisa检测试剂盒

人AT丰富结合域1A(ARID1A)elisa分析检测试剂盒

人AT丰富结合域1A(ARID1A)elisa检测试剂盒免费代测

人A激酶PRKA锚定蛋白12(Akap12)elisa分析检测试剂盒
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

更新时间：2024/4/28 11:36:06

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