详细内容
用途: 甲基汞凝胶电泳
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
甲基汞凝胶电泳缓冲液(10×) |
| 500mL |
注意事项:
主要由硼酸、四硼酸钠、硫酸钠等组成。
储存条件:室温,12个月
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
超微量ATP酶测试盒Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶 50管/25样 100管/50样 比色法
超微量ATP酶测试盒Na+K+、Ca2+Mg2+、T-ATP酶 50管/25样 100管/50样 比色法
Mg2+-EGTA-ATP酶测试盒 50管/25样 100管/50样 比色法
微量游离血红蛋白FHb测试盒 50管/48样 比色法
全血2,3-二磷酸甘油酸2,3-DPG测试盒 50管 比色法
大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa分析检测试剂盒
大鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)elisa分析检测试剂盒
大鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)elisa分析检测试剂盒
大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)elisa分析检测试剂盒
大鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)elisa分析检测试剂盒
甲基汞凝胶电泳缓冲液(10×)人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)elisa分析检测试剂盒
人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)elisa检测试剂盒
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)elisa分析检测试剂盒
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)elisa检测试剂盒
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)elisa检测试剂盒
更新时间:2023/12/21 16:15:27
留言框 | |
感兴趣的产品: | * |
您的单位: | * |
您的姓名: | * |
联系电话: | * |
详细地址: | |
常用邮箱: | |
您的任何要求、意见或建议: * |
|
验证码: | * |
请输入要搜索的关键词
上海谷研实业有限公司:elisa试剂盒,细胞,标准品,菌种
地址:上海市嘉定区嘉罗公路1661号23号楼311 电话:021-39596320 传真: 技术支持:阿仪网 总访问量:3021249