红色荧光核酸染料

详细内容

GelHong核酸红色荧光染料是一种可以替代溴化乙锭（EB）的红色荧光核酸染色剂。与SYBR或EB相比，GelHong显著的特性是其在多种条件下的高灵敏性和稳定性。另外相对EB或SYBR，GelHong诱导突变的能力低。

图

保存：4～8℃，有效期两年。室温避光可保存6个月。

使用方法：

染料使用应在室温下彻底融化混匀后使用。

GelHong预染方法（推荐）：

将GelHong试剂按1:10000溶于琼脂糖凝胶溶液中，充分混匀。例如：将5μL GelHong试剂加入到50mL凝胶溶液中。

注意：由于GelHong具有出色的热稳定性，可将试剂直接加入高温的凝胶溶液中，而不用等凝胶溶液冷却后再加入。

浇制凝胶并使其凝固后上样电泳。

注意：使用这种预先加入染色剂的琼脂糖凝胶，每次不易加入太多的DNA样品，否则容易造成饱和现象，可以做多个不同浓度的DNA Marker，以确定佳DNA上样量。

紫外下观察结果。

注意：如果始终出现拖尾或是条带无法分离的现象，您可以使用后染法对DNA染色，以确认问题是否与染色剂有关。如果使用后染法问题依旧存在，则说明问题与染色剂无关，请尝试减少核酸的上样量后进行电泳。

GelHong后染方法：

用H2O将GelHong稀释约3300倍到0.1M NaCl中，制成3X染色溶液。例如：将15μL GelHong和5mL的1M NaCl加入到45mL H2O中。

注意：GelHong 1X染色溶液同样可用于后染，但其灵敏度要低于3X染色溶液。

将凝胶小心地放入合适的容器中，如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3X染色溶液浸没凝胶。

在室温下轻轻地摇动凝胶板，佳的染胶时间为30分钟，这取决于凝胶板的厚度、琼脂糖或聚丙烯酰胺的浓度和DNA的长短。凝胶越厚或琼脂糖的浓度越高，染色所需要的时间就越长。

注意：染色溶液至少可重复使用2～3次。如果不是立即再用的话，建议将用过的染色溶液冷藏保存。

紫外下观察结果。
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
Masson染色试剂盒120ml

革兰氏染色试剂盒200ml

瑞氏染色试剂盒100ml

瑞氏染色试剂盒500ml

姬姆萨染色试剂盒80ml
大鼠肌球蛋白ⅠA(MYO1A)elisa检测试剂盒

大鼠肌腱蛋白X(TNX)elisa检测试剂盒

大鼠肌腱蛋白C(TNC)elisa检测试剂盒

大鼠肌肌酸激酶(CKM)elisa检测试剂盒

大鼠肌红蛋白(MYO)elisa检测试剂盒
红色荧光核酸染料牛白三烯B4(LT-B4)elisa检测试剂盒

牛表皮生长因子(EGF)elisa检测试剂盒免费代测

牛丙二醛(MDA)elisa检测试剂盒

牛丙二酸单酰辅酶A(malonyl CoA)elisa检测试剂盒

牛雌二醇（E2）elisa检测试剂盒

更新时间：2024/3/12 9:23:55

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