详细内容
TBE Buffer全名为Tris-Borate-EDTA buffer。它主要用于DNA的琼脂糖电泳和DNA和RNA的PAGE电泳。跟TAE相比,其特点是含硼酸,可能会影响连接等后续酶反应。硅胶模回收时,回收率比TAE低。缓冲能力强于TAE,可反复使用几次。PAGE电泳好使用1×,琼脂糖电泳可以使用0.5×。线性双链DNA的泳动速度慢于TAE。好不要使用含甘油的上样品液,因为甘油可使硼酸多次解离,改变pH。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
TBE电泳液,10× | 10×TBE Buffer | 250mL |
储存条件:常温运输及保存、有效期一年。长时间放置可能会出现沉淀。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
Room Cleaner(细胞房除菌剂)Aspartame228397阿司帕坦
Bath Cleaner0 mLArtesunate884953青蒿琥酯
Incubator Cleaner4 mLArtemether719637蒿
Room Cleaner4 mLAripiprazole1297222阿立哌唑
Tray Cleaner mLArillatose B1379415
小鼠干扰素 - a (mouse IFN- a ) 作用: ELISA 规格: 72T 美国 R&D Ethyl 2-ethoxy-1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-1H-benzimidazole-7-carboxylate 中文名: 分子式:C26H23N3O3
小鼠肝脂酶elisa试剂盒 小鼠肝脂酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠肝脂酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠肝脂酶试剂盒、小鼠肝脂酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Chenodeoxycholic acid 中文名:鹅去氧胆酸 分子式:C24H40O4
小鼠肝脂酶(HL)ELISA试剂盒 D-Aspartic acid 中文名:D-天冬氨酸 分子式:C4H7NO4 度:98.0%
小鼠肝脂酶(HL)ELISAKit Hydrocortisone 50-23-7 中文名: 分子式:C21H30O5
小鼠肝炎病毒抗体(HV-Ab)ELISA试剂盒 D-Aspartic acid 中文名:D-天冬氨酸 分子式:C4H7NO4
TBE电泳液,10×5-Aminofluorescein 3326-34-9 中文名:5-氨基荧光素 分子式:C20H13NO5 度:98.0% 关键词: 小鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)ELISAKit
5-Amino-2-naphthalenesulfonic acid 119-79-9 中文名:5-氨基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO3S 度:98.0% 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISAKit
5-Amino-2-methylindole 7570-49-2 中文名:5-氨基-2-甲基吲哚 分子式:C9H10N2 度:98.0% 关键词: 小鼠抗内膜抗体(EMAb)ELISAKit
5-Amino-1-naphthol 83-55-6 中文名:5-氨基-1-萘酚 分子式:C10H9NO 度:98.0% 关键词: 小鼠低密度脂蛋白复合物(LDL-IC)ELISAKit
5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole 73616-27-0 中文名: 分子式:C5H9N3O 度:98.0% 关键词: 小鼠解脲脲原体抗体(UU-Ab)ELISAKit
更新时间:2024/4/15 11:32:52
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