三合一RNA上样液(A型,6X)

详细内容

本品是集RNA变性RNA、上样、RNA染色三种功能于一体的即用型溶液。

产品特点：

1．能提高RNA上样速度，免去繁琐的准备步骤，减少污染。

2．其含有的RNase抑制剂能抑制RNA样品中残留RNase的活性，保证电泳过程中RNA的完整性。

3．所含甘油和染料(仅BTN3130A含EB染料)，便于直接上样和UV观察RNA电泳条带，免去染色和脱色过程。

4．本产品与DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2完全兼容。

储存条件：常温运输，4℃(短期)或-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. 按1:1-1:3的比例将RNA样品与RNA上样液混合(如5μL RNA+15μL RNA上样液)。

2. 65-85℃水浴保温10分钟,。

3. 冰浴5分钟后即可直接上样电泳。

?注：本产品含EB，所以琼脂糖凝胶中可以不必再加EB。本产品与甲醛琼脂糖变性凝胶或用DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2配制的非变性琼脂糖变性凝胶兼容。

4.电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果，RNA 条带成红色。
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
TE 1× pH8.00ml /0ml 2-Deoxy,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-ulose,5-dibenzoate1221111

TE × pH8.0 0ml /0ml 2-Cyclopropyl-(4-fluorophenyl)-quinolyl-methanol12161

Tetracycline solution 四环素溶液 mg/ml5×1ml/2-Cyclopropyl-(4-fluorophenyl)quinoline-carboxaldehyde12167

Timentin溶液5×1ml2-Cyclopropyl-[(diphenylphosphinyl)methyl]-(4-fluorophenyl)quinoline1465789

Trypan Blue Staining Solution 台盼蓝染色液 ml2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide2452
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISAKit                 Methyl 1-[(2＇-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-2-ethoxy-1H-benzimidazole-7-carboxylate  139481-44-0  中文名： 分子式：C25H21N3O3 

小鼠二0酸腺苷(ADP)ELISA试剂盒     Dabigatran etexilate  211915-06-9  中文名： 分子式：C34H41N7O5 

小鼠二(MDA)ELISAKit     Gracillin  中文名：纤细薯蓣皂苷 分子式：C45H72O17 

小鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒              D(-)-Arginine  中文名：D-精氨酸 分子式：C6H14N4O2 

小鼠多效生长因子   英文名称：   Pleioophin   规格：   48T/96T   英文缩写：   PTN  Gemcitabine  95058-81-4  中文名：吉西他滨 分子式：C9H11F2N3O4  度：98.0%  关键词：
三合一RNA上样液(A型,6X)4-Amino-3-hydroxybenzoic acid  2374-03-0  中文名：4-氨基-3-羟基苯甲酸 分子式：C7H7NO3  度：98.0%      小鼠巨噬细胞炎性蛋白-3α   英文名称：   Macrophage Inflammatory protein 3α   规格：   48T/96T   英文缩写：   MIP-3α

4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid  116-63-2  中文名：4-氨基-3-羟基-1-萘磺酸 分子式：C10H9NO4S  度：98.0%      小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒  

4-Amino-3,5-dichloropyridine  22889-78-7  中文名： 分子式：C5H4Cl2N2  度：98.0%  关键词：    小鼠巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒  

4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide  52298-44-9  中文名：4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺 分子式：C14H16N2O4S  度：99.0%  关键词：    小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒  

4-Allyloxy-2-hydroxybenzophe  2549-87-3  中文名：4-丙烯氧基-2-羟基二苯甲酮 分子式：C16H14O3  度：99.0%  关键词：    小鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒

更新时间：2024/2/1 9:33:41

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