详细内容
SYBR Green I,EG是电泳低毒高灵敏的花青类DNA荧光染料,适用于各种核酸电泳分析。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
电泳SYBR Green I | SYBR GreenⅠ, electrophoretic grade | 50μL |
产品特点:
1.低毒安全,其致突变性低于EB 数倍甚至数十倍。
2. 髙灵敏,SYBR Green I与dsDNA 结合,荧光信号会增强800-1000倍,至少可检出 20 pg DNA,灵敏度高于EB染色法10-25倍。
3.适用范围广,可适用于多种电泳分析,包括琼脂糖凝胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳等。与我司的SuperBuffer-2 兼容。
4. 不影响其它修饰酶(Taq酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)作用。
5. 操作简单,无须脱色或冲洗。
储存条件:常低温运输,-20℃闭光保存,有效期一年。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
TMB显色液(沉淀型,组化或膜HRP显色用) 0ml 4-Androstenediol115624-雄烯二醇
Western二抗稀释液 0ml4-Aminosalicylic acid6594-氨基水杨酸
Western封闭液I(BSA) 0ml4-Aminopyrazolo[3,4-d]pyrimidine2334-氨基吡唑并[3,4-d]嘧啶
Western封闭液II(奶粉) 0ml4-Aminophthalimide367654-氨基
Western封闭液III(磷酸化抗体) 0ml4-Aminophenylarsonic acid94-胂酸
小鼠对基苯(PABA)ELISAKit Dihydroisotanshi I 中文名: 分子式:C18H14O3
小鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒 Cyproheptadine 中文名:盐酸赛庚啶 分子式:C21H22ClN
小鼠端粒酶(mouse Telomerase) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 N-Demethylricinine 21642-98-8 中文名: 分子式:C7H6N2O2 度:98.0% 关键词:
小鼠毒性休克综合征elisa试剂盒 小鼠毒性休克综合征试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠毒性休克综合征试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠毒性休克综合征试剂盒、小鼠毒性休克综合征eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Cyproterone acetate 中文名:醋酸环丙氯地孕酮 分子式:C24H29ClO4 度:98.0%
小鼠毒性休克综合征1(TSST-1)ELISAKit Mesterolone 1424-00-6 中文名:甲氢 分子式:C20H32O2 度:98.0% 关键词:
电泳SYBR Green I4,4'-Dimethoxytrityl chloride 40615-36-9 中文名:4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷 分子式:C21H19ClO2 度:98.0% 关键词: 小鼠去甲上腺素 英文名称: Mouse Nor 规格: 48T/96T 英文缩写: NADR
4,4'-Diaminodiphenylsulfone 80-08-0 中文名:4,4'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S 度:98.0% 小鼠非肌性肌球蛋白重链9 英文名称: nonMyosin Heavy Chain 9 规格: 48T/96T 英文缩写: nonMYH9hc
4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 843-55-0 中文名:4,4'-环亚己基双苯酚 分子式:C18H20O2 度:98.0% 小鼠巨噬细胞来源的趋化因子(mouse MDC) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
4,4'-Bis(diethylamino)benzophe 90-93-7 中文名:四乙基米氏酮 分子式:C21H28N2O 度:98.0% 小鼠髓过氧化物酶(mouse MPO) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene 2397-00-4 中文名:4,4'-双(5-甲基-2-苯并恶唑基)芪 分子式:C30H22N2O2 度:98.0% 关键词: 小鼠粘蛋白(mouse MUC5AC) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
更新时间:2024/4/29 9:55:58
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