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点击次数:1024 发布时间:2022/3/1 9:13:50
本系列产品为传统的酶切分子量标准,由单一的质粒DNA或DNA经单个限制性内切酶完成消化后,加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知,每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。
产品名称 | 英文名称 | 规格 |
DNA marker(λDNA/HindIII) | DNA ladder(λDNA/HindIII) | 50次 |
?每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5uL。
Western及IP细胞裂解液 0 ml4-Aminophenylacetic acid119754-基乙酸
Western一抗稀释液 0ml4-Amino-N-methylphthalimide24-氨基-N-甲基
电转滤纸 薄 4-Amino-N-methylbenzamide627424-氨基-N-甲基苯甲酰胺
红细胞裂解液 1 ml4-Aminohippuric acid6184-氨基马尿酸
丽春红染色液 0 ml4-Aminobutyric acid1956/12/24-氨基丁酸
小鼠蛋酸酯酶2B(PP-2B)ELISA试剂盒 Crenulatin 中文名:大花红天素 分子式:C11H20O6 度:98.5%
小鼠蛋酸酶elisa试剂盒 小鼠蛋酸酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠蛋酸酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠蛋酸酶试剂盒、小鼠蛋酸酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Cyromazine 中文名:环丙氨嗪 分子式:C6H10N6 度:98.0%
小鼠蛋酸酶(PP)ELISA试剂盒 Crenulatin 中文名:大花红天素 分子式:C11H20O6
小鼠蛋白质二硫键异构酶(PDI)ELISA试剂盒 Creoside III 1038602-12-8 中文名: 分子式:C18H24O9
小鼠蛋白激酶elisa试剂盒 小鼠蛋白激酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠蛋白激酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠蛋白激酶试剂盒、小鼠蛋白激酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Cryptanoside A 中文名: 分子式:C30H42O10
DNA marker(λDNA/HindIII)3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one 972-46-3 中文名:3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮 分子式:C21H30O2 度:98.0% 小鼠活化素A(ACV-A)ELISAKit
3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid 99469-99-5 中文名: 分子式:C13H16O5 度:98.0% 关键词: 小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISAKit
3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid 162401-62-9 中文名: 分子式:C12H12F2O4 度:98.0% 关键词: 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISAKit
3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene 443882-99-3 中文名: 分子式:C13H9ClFNO3 度:98.0% 关键词: 小鼠角化细胞因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISAKit
3-Chloro-1-(4-octylphenyl)-1-propa 928165-59-7 中文名: 分子式:C17H25ClO 度:98.0% 关键词: 小鼠活化素A(ACV-A)ELISAKit
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
更新时间:2024/5/9 14:44:07
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