Carrier RNA

详细内容

Carrier RNA主要用于微量样本特别是病毒样本提取RNA时，帮助提升RNA的回收效率。本Carrier RNA为非病毒来源的RNA，不会干扰病毒RNA的后续检测。本Carrier RNA浓度为1μg/μL。

本Carrier RNA适用于大部分病毒RNA提取试剂盒，如的RNasy病毒RNA抽提试剂盒(离心柱式，货号：YTB4090)。一方面可以提高微量病毒RNA在纯化过程中与纯化柱的结合效率和洗脱效率，另一方面可以减少被可能存在的少量残留RNase降解的概率。Carrier RNA在病毒含量较少的情况下效果更明显。另外，常用的EP管的材料是聚丙烯，管壁上有静电，会吸附核酸，提取RNA时直接将Carrier RNA添加至裂解液中，Carrier RNA可以很好地被吸附到纯化柱上，有效地去除静电效应，提高洗脱效率。

注意事项：

本产品-20℃保存，一年有效；-80℃保存，两年有效。需避免反复冻融，初次使用时建议适当分装并于-20℃或更低温度密封保存。

操作时应小心，避免污染，请用RNase-free的枪头和EP管。建议戴一次性口罩操作。

对于样品量较少或提取病毒RNA时建议使用Carrier RNA；如果预期RNA量较大，可根据需要选择是否加入Carrier RNA。

由于含有Carrier RNA，病毒RNA的浓度会不准确，建议使用qRT-PCR法进行定量。

使用说明：

每个病毒样品需要2～5μg Carrier RNA，直接添加至RNA抽提试剂盒中提供的裂解液中即可。例如，一个病毒样品，取3μL的Carrier RNA (1μg/μl)添加至300μL的裂解液中，混匀后加入到病毒样品。

后续按照RNA抽提试剂盒的操作步骤进行RNA的提取。
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
阿莫西林残留酶联免疫检测试剂盒Damnacanthal4774虎刺醛

伏马菌素残留酶联免疫检测试剂盒Dabigatran etexilate2119156

氟喹诺酮类药物和磺胺类药物残留酶联免疫检测试剂盒Dabigatran etexilate benzenesulfonate1965苯磺酸达比加群酯

苏丹红残留酶联免疫检测试剂盒D(-)-Arginine1576D-精氨酸

邻苯二甲酸二丁酯残留酶联免疫检测试剂盒Cyromazine662157环丙氨嗪
小鼠促甲状腺素释放激素(H)ELISAKit     N6-Benzoyladenine  中文名：N6-苯甲酰基腺嘌呤 分子式：C12H9N5O 

小鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒     Cleroindicin C  中文名： 分子式：C8H12O3  度：%

小鼠促甲状腺素(TSH)ELISAKit     cis-Octahydro-isoindole  中文名： 分子式：C8H15N  度：98.0%

小鼠促甲状腺素   英文名称：   Mouse Thyroid Stimulating Hormone   规格：   48T/96T   英文缩写：   TSH  Metoclopramide  中文名：甲氧氯普胺 分子式：C14H22ClN3O2 

小鼠促黄体生成激素(mouse LH)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Cleroindicin B  107389-91-3  中文名： 分子式：C8H14O3  度：96.0%  关键词： 红波罗花; 长管大青; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
Carrier RNA2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic acid  104239-97-6  中文名： 分子式：C19H28INO3  度：98.0%  关键词：    小鼠基质金属蛋白酶抑制剂-1(mouse TIMP-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester  124111-47-3  中文名： 分子式：C26H52O3  度：98.0%  关键词： 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠基质金属蛋白酶抑制剂-2(mouse TIMP-2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

2-Hydroxyquinoxaline  1196-57-2  中文名： 分子式：C8H6N2O  度：98.0%  关键词：    小鼠坏死因子-a(mouse TNF-a)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

2-Hydroxy-3-methylanthraqui  17241-40-6  中文名： 分子式：C15H10O3  度：%  关键词： 白花蛇舌草; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠坏死因子-b(mouse TNF-b)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

2-Flurbiprofen  51543-40-9  中文名：氟比洛芬  分子式：C15H13FO2  度：98.0%  关键词：    小鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒

更新时间：2024/3/29 10:13:07

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