详细内容
点击次数:1036 发布时间:2022/2/15 9:44:53
测定意义
α-KGDH(EC 1.2.4.2)广泛存在于动物、植物微生物和培养细胞的线粒体中,是三羧酸循环调控关键酶,催化α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅酶A。
测定原理
α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和辅酶A生成琥珀酰辅酶A、 二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测试盒特供 | 50管/48样、100管/96样 | 微量法、紫外分光光度法 | GOY-01S6438 |
操作步骤:
实验开始,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
NaGreen000×0uEdaravone895依达拉奉
NaRed II 核酸染料0ulTazobactam acid897864他唑巴坦酸
反(逆)转录酶 Super M-MuLV Reverse Transcriptase0000UChloramphenicol565氯霉素
MICROFIL® Silicone Rubber Injection Compounds1 lbGanciclovir8242更昔洛韦
葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Salt,DSS)0gOxiracetam626132奥拉西坦
羟基松香酸 HPLC≥98% 5mg Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISA试剂盒小鼠酶2(CA-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
羟基,,,四甲氧基山山酮 HPLC≥98% 10mg MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISA试剂盒小鼠Ⅰ型胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氧乙酰旋覆花内酯 HPLC≥98% 20mg Mousecarcinoembryonicaign,CEAELISA试剂盒小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA试剂盒规格:96T/48T
,,,'四羟基二苯乙烯葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg MousecardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA试剂盒小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
”O没食子酰基金丝桃苷 HPLC≥98% 20mg Mousecardioophln1,CT-1ELISA试剂盒小鼠心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
(R)人参皂苷Rg HPLC≥98% 20mg Mousecatecholamine,CAELISA试剂盒小鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
(R)原人参三醇 HPLC≥98% 20mg MouseCeruloplasmin,CP/CERELISA试剂盒小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去氧巨大戟萜醇 HPLC≥98% 20mg Mousec-fosELISA试剂盒小鼠c-fosELISA试剂盒规格:96T/48T
S羟基,二氧灵芝酸DM HPLC≥98% 5mg MouseCholecystokinin,CCKELISA试剂盒小鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
羟基白桦酸 HPLC≥98% 20mg Mousecholesterolesteransferprotein,CETPELISA试剂盒小鼠胆酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测试盒特供兔子红细胞生成素(EPO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 (-)-Noe's Reagent 108031-79-4 中文名:(-)-核欧沃豪斯效应试剂 分子式:C24H38O3 度:98.0%
兔子骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒 7-Amino-4-methylcoumarin 中文名:7-氨基-4-甲基 分子式:C10H9NO2 度:98.0%
兔子骨胶原交联(Cr)ELISAKit 9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 中文名: 分子式:C18H30O3 度:95.0%
兔子骨胶原交联(Cr)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 ((2-cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinolin-3-yl)methyl)triphenylphosphonium bromide 中文名: 分子式:C37H30BrFNP 度:98.0%
兔子(T)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备:
培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
更新时间:2024/1/23 9:29:20
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