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点击次数:1059 发布时间:2022/2/15 8:44:20
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
线粒体活性氧产生速率(ROS)测试盒价格 | 100管/96样 | 荧光法 | GOY-01S6365 |
测定意义
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,研究表明,机体95%以上的活性氧(ROS)都来自于线粒体,其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。
正常情况下,细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态,细胞内活性氧(ROS)水平维持在较低的生理范围;在病理情况下,细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破,细胞内活性氧水平过多,就可破坏线粒体酶类、脂类和核酸,使机体出现氧化应激,同时,活性氧还可攻击线粒体DNA产生氧化损伤,导致线粒体ATP合成减少、线粒体膜电位破坏等结构和功能变化。
因此,通过检测活性氧的变化来判断线粒体的功能是否正常具有重要意义。
测定原理:
荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜,在线粒体内被酯酶水解,形成无荧光的DCFH,DCFH迅速与ROS反应生成荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根据上述原理设计了利用荧光法直接定量检测线粒体ROS产生速率的方法。将荧光强度随时间变化的数据点拟合,线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。
需自备的仪器和用品:
多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备:
培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
操作步骤:
实验开始,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
Anti-TNFα单克隆抗体大于1mg9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene11734429,9-双[4-(2-羟乙氧基)苯基]芴
Anti-IL6R单克隆抗体大于1mg9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene323619,9-双(4-羟苯基)芴
Anti-IL12单克隆抗体大于1mg9,9-Bis(4-amino-methylphenyl)fluorene7934,9-双(4-氨基-甲苯基)芴
IL2(human、his标签)0ug9,17-Octadecadiene2,14-diyne,11,16-triol211238-
IL2(human、无标签)0ug9,16-Dioxo0,12,14-octadecatrienoic acid21786
镁试剂II MagnesonII 质量规格:AR 人抗氨酰NA合成酶,细胞质(AARS)抗体试剂盒 Human ai alanyl-NA syhetase,cylasmic(AARS)aibody ELISA kit
高铁试剂 Ferron 质量规格:AR,98.5% 人抗氨酰NA合成酶,线粒体(AARS2)抗体试剂盒 Human ai alanyl-NA syhetase,mitochondrial(AARS2)aibody ELISA kit
酚试剂(3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐) 3-Methyl-2-benzothiali 质量规格:AR,>98% 人抗白蛋白抗体(AAA)试剂盒 Human ai-albumin aibody,AAA ELISA Kit
米格列醇 Miglitol 质量规格:>98%,BR 人抗白色念珠菌(C.albicans)IgE抗体 试剂盒 Human Candida Albicans(C.albicans)IgE aibody ELISA Kit
米格列醇(标准品) Miglitol 质量规格:GC>98%,标准品 人抗斑疹伤寒抗体(ai-typhus-Ab)试剂盒 Human ai-typhus aibody ELISA Kit
1-萘酚酞 1-Naphtholphthalein 质量规格:进口原装,>98% 人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)试剂盒 Human epidermal baseme membrane zone,EBMZ ELISA Kit
盐酸达泊西汀(混旋) Dapoxetine 质量规格:>99%,混旋 人抗补体1q抗体(ai-C1q-aibody)试剂盒 Human ai-C1q-aibody ELISA Kit
盐酸达泊西汀(右旋) Dapoxetine 质量规格:>99%,右旋 人抗促甲状腺素受体抗体(Ab)试剂盒 human thyroid stimulating hormone receptor aidoby,Ab ELISA Kit
固黑K盐 Fast Black K Salt 质量规格:>80%,BR 人抗促卵泡素抗体(Ai FSH Ab)试剂盒 Human Ai FSH Ab ELISA Kit
氨基黑10B Amido black 10B 质量规格:AR 人抗单核细胞抗体(AMA)试剂盒 Human ai-Monocyte aibody,AMA ELISA Kit
线粒体活性氧产生速率(ROS)测试盒价格豚鼠球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒 Amlexanox 68302-57-8 中文名:氨来呫诺 分子式:C16H14N2O4
豚鼠球蛋白Eelisa试剂盒 豚鼠球蛋白E试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠球蛋白E试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠球蛋白E试剂盒、豚鼠球蛋白Eeisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Amitraz 33089-61-1 中文名:双甲眯 分子式:C19H23N3
豚鼠球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 Amitriptyline 中文名:盐酸阿米替林 分子式:C20H24ClN 度:98.0%
豚鼠球蛋白E(IgE)ELISAKit Amitriptyline 549-18-8 中文名:盐酸阿米替林 分子式:C20H24ClN
豚鼠球蛋白E 英文名称: Immunoglobulin E 规格: 48T/96T 英文缩写: IgE Allyl cinnamate 中文名:肉桂酸烯丙酯 分子式:C12H12O2 度:98.0%
更新时间:2024/3/18 10:08:27
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