elisa试剂盒实验比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体,然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。
以软板为载体的试验,需先将板置于标准96孔的座架中,才可进行比色。在加底物液显色前,先将软板边缘剪
净,这样,此板就可完全平妥坐入座架中。比色时应先以蒸馏水校零点,测读底物孔(未经任何反应仅加底物液的
孔)和空白孔(以生理盐水或稀释液代替标本作全过程的孔),以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸
馏水校零点,以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度,然后进行计算。
标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
ELISA标本之脑血浆的稀释:
1.用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分钟,4℃,分离血浆样品,然后储存在零下80℃直到使用。
2.用试剂盒中的标准稀释液5倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测,按照说明书指定方法检测。
比色结果的表达以往通用光密度(oplical density,OD),现按规定用吸光度(absorbence,A),两者含义
相同。通常的表示方法是,将吸收波长写于A字母的右下角,如OPD的吸收波长为492nm,表示方法
为"A492nm"或"OD492nm"。
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