大鼠肠静脉组织提取物胞细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用门配制的wan全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型wan全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
SMMC-7721(人肝癌细胞)
SP2/0(小鼠骨髓瘤细胞)
SPC-A-1(人肺癌细胞)
ST(猪睾丸细胞)
STO(小鼠胚成纤维细胞)
SVEC4-10(小鼠淋巴结内皮细胞)
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化细胞)
SW480(人结肠癌细胞)
SW579(人甲状腺鳞癌细胞 )
SW620(人结肠癌细胞)
SW626(人卵巢癌细胞)
T-24(人膀胱癌细胞)
T-47D(人乳腺管癌细胞)
T84(人结肠腺癌肺转移细胞)
Tca-8113(人舌鳞癌细胞)
TE-1(人食管癌细胞)
TF-1(人血液白血病细胞)
THP-1(人髓系白血病单核细胞)
TM3(小鼠睾丸间质细胞)
TSCCa(人舌鳞癌细胞)
U-2 OS(人骨肉瘤细胞)
U251(人胶质瘤细胞)
U-87 MG(人神经胶质瘤细胞)
U-937(人组织细胞淋巴瘤细胞)
V79(仓鼠肺细胞)
VCaP(人列腺癌细胞)
原创作者:上海谷研实业有限公司